Тонкошарова хроматографія

Тонкошарова хроматографія – це метод хроматографії, який широко використовується в синтетичній хімії метод для ідентифікації сполук, визначення їх чистоти й відстеження ходу реакції. Дослідження методом тонкошарової хроматографії (ТШХ) проводиться на аркуші інертної підкладки, в ролі якої виступають скло, пластик або алюмінієва фольга, покрита тонким шаром адсорбувального матеріалу, наприклад, целюлози, силікагелю або оксиду алюмінію (глинозему). Шар адсорбенту називають «стаціонарною фазою». Після нанесення зразка на пластину, розчинник або суміш з декількох розчинників («рухома фаза») витягується вгору по пластині за допомогою капілярного ефекту.

Підготовка пластини

В якості стаціонарної фази на скляну пластину, метал або пластикову плівку тонким шаром (близько 0,25 мм) наноситься спеціальна тонкоподрібнена матриця (силікагель, глинозем або аналогічний матеріал). Щоб полегшити приєднання до предметного скла, до стаціонарної фази також додається сполучна речовина. Щоб спростити подальшу візуалізацію флуоресцентний порошок (наприклад, яскраво-зелений, підготовлений до впливу ультрафіолетового випромінювання) часто змішують з нерухомою фазою.

Щоб отримати уявну стартову лінію з кожного боку пластини робляться отвори. Тонку лінію можна також намалювати олівцем. Стартова лінія повинна знаходитися на відстані 0,5-1 см від нижньої частини пластини.

Досвід

Невелика кількість розчинника (рухома фаза) поміщається в контейнер. Рівень розчинника повинен бути нижче початкової лінії ТШХ, інакше плями розчиняються. Тонкий кінець капіляра опускають на в пластину на лінії старту. Після того, як почнеться дія розчинника, пляма наноситься на те ж місце кілька разів. Таким чином виходить невелика концентрована пляма.

Тонкий кінець пластини поміщають в розбавлений розчин, який відразу починає підніматися вверх під дією капілярного ефекту. Розчинник (елюент) переміщується вгору. При цьому компоненти зразка переміщуються з різною швидкістю через відмінності ступеня взаємодії з матрицею (стаціонарна фаза) і розчинності в розчиннику, що розвивається.

Варто уникати виділення великого обсягу матеріалу, тому, що це збільшить «хвіст» і значно погіршить якість поділу. Плями повинні бути досить далеко від країв пластини й один від одного. Якщо можливо, варто визначити склад або суміш разом з вихідними матеріалами та можливими проміжними продуктами на пластині. Вони будуть служити внутрішнім орієнтиром, оскільки кожна пластина ТШХ трохи відрізняється.

Розчинник підіймається вгору по пластині, слід не допустити, щоб розчинник досяг її краю. Коли до краю пластини залишається 1-2 см, вона виймається з посудини, на ній відзначається ступінь поширення розчинника. Потім пластину залишають, щоб розчинник повністю випарувався. Утворені в ході хроматографії тонкошарової плями на пластині відзначають маркером.