ТОП 5 причин, чому pH важливий для здоров’я клітин

pH – це концентрація іонів водню (H⁺) у розчині. Параметр, який характеризує кислотність або лужність розчину. Шкала pH варіюється від 0 до 14:

• 0–6 — кисле середовище;
• 7 — нейтральне середовище;
• 8–14 — лужне середовище.

Контроль pH має значення в різних сферах. У харчових продуктах він важливий для запобігання розвитку шкідливих бактерій та покращення смакових якостей. У косметиці та засобах для догляду за шкірою pH допомагає збалансувати продукти для запобігання подразненню шкіри та підтримання її природного кислотного бар’єру. Знання рівня pH продуктів допомагає краще підбирати їх для організму та шкіри, підтримуючи здоров’я і комфорт.

Здоров’я клітин (cell health) — це загальний показник стану клітини, що характеризує її здатність виконувати життєво важливі функції, такі як ріст, поділ, метаболізм та захист від зовнішніх впливів. Здорові клітини є основою для нормального функціонування організму, адже вони забезпечують правильне протікання біохімічних процесів і підтримують тканини та органи в належному стані.

5 причин, чому правильний pH є критично важливим для здоров’я клітин:

• Клітини нездорові, коли pH занадто кислий або занадто лужний.

Регуляція внутрішньоклітинного рН має вирішальне значення для нормального функціонування клітин. Ріст і проліферація клітин ссавців вимагають, щоб внутрішньоклітинний рН залишався в діапазоні від 7,0 до 7,2. Позаклітинний рН трохи лужніший, зазвичай в діапазоні 7,35-7,45. Зміни рН середовища для культивування клітин можуть суттєво впливати на сигнальні функції клітин та клітинні процеси, такі як метаболізм і ріст.

Для отримання високоякісних даних і відтворюваних вимірювань pH використовуйте комбінований мікроелектрод pH Orion™ PerpHecT™ ROSS™ від Thermo Scientific™ для вимірювання pH культуральних середовищ у вашій лабораторії. Комбінований pH-мікроелектрод Orion PerpHecT ROSS дозволяє дослідникам вимірювати pH невеликих зразків в 384-лункових планшетах або зразків з глибиною занурення 4,5 мм.

• Вплив рН комплексоутворюючих розчинів на трансфекцію.

Перехідна трансфекція є життєво важливим інструментом клітинної біології та біофармацевтичного виробництва. Катіонні полімери, такі як поліетиленімін (PEI) і катіонні ліпіди, такі як 1,2-діолеоїл-3-триметиламонійпропан (DOTAP), зазвичай використовуються для приготування трансфекційних комплексів. Фактори, що впливають на формування ліпосомального трансфекційного комплексу, або ліпоплексу, включають співвідношення комплексоутворювача до нуклеїнової кислоти, склад розчину для комплексоутворення, час комплексоутворення та рН. Рівень рН, при якому формується ліпоплекс, може впливати на його кінцеву долю в трансфікованих клітинах, тому контроль рН розчинів для комплексоутворення є особливо важливим.

Виберіть pH/ATC-електрод Thermo Scientific™ Orion™ ROSS Ultra™ Triode™ pH/ATC, який має швидкий відгук, забезпечує стабільні та точні показники pH. Конструкція з подвійним з’єднанням захищає ваш зразок від впливу срібла і є сумісною з трометаміном (Tris), білками та сульфідами.

• Розчини повинні мати правильний pH під час аналізу рекомбінантних білків.

Виробництво рекомбінантного білка передбачає трансфекцію клітин ДНК-вектором, що містить ген білка, який нас цікавить, і культивування клітин для синтезу білка. Теоретично, експресований білок повинен бути готовий до подальших експериментів після виробництва та очищення. В реальності, на кожному етапі виробництва рекомбінантного білка є змінні, залежні від рН, які можуть впливати на вихід білка і його продуктивність. Дуже важливо контролювати рН протягом усього процесу виробництва рекомбінантного білка, оскільки це впливає на кількість і якість білка, а також на його поведінку в подальших експериментах.

Використовуйте індивідуальні пакування з буфером pH Orion, щоб забезпечити точне зчитування буфера при кожному калібруванні.

• Точний контроль pH необхідний для епігенетичного аналізу.

Метою епігенетичного аналізу є розуміння рівня взаємодії між генами та білками, такими як фактори транскрипції та по-різному модифіковані гістони. Багато проблем зі здоров’ям пов’язані з епігенетичними механізмами, включаючи різні види раку, когнітивну дисфункцію, а також респіраторні, серцево-судинні, репродуктивні, аутоімунні та нейроповедінкові захворювання. Однак дослідження мереж генної регуляції вимагає дуже складних експериментальних протоколів. Первинні клітини слід культивувати при ідеальному рН, щоб відстежувати експресію генів і регуляторні механізми, відповідальні за підтримання клітин у здоровому стані. Підготуйте реагенти з точними та відповідними значеннями рН, щоб мінімізувати протеолітичну деградацію білків, які вас цікавлять.

Часте калібрування, очищення та правильне зберігання електродів у розчинах для очищення та зберігання електродів Thermo Scientific™ Orion™ допомагають забезпечити точність вимірювань pH протягом тривалого часу. Замочування електродів у розчині для зберігання Orion між використаннями відновлює скляний сенсор, що забезпечує швидкі та точні показники.

• Рівень рН біологічних буферів може суттєво змінюватися залежно від температури.

Кожен біологічний буфер має температурну залежність pKa, що визначається температурним коефіцієнтом ΔpKa/ΔT. Якщо ви підготуєте буфер і налаштуєте його рН при 20°C, рН буфера не буде однаковим при 37°C або 4°C. Типовий фосфатний буфер має невелику різницю ΔpKa/ΔT, і вплив температури на рН є незначним. Для інших буферів, таких як MOPS і трометамін(Tris), вплив є більш значним.

Використання pH-метра Thermo Scientific™ Orion™ Versa Star Pro™ з Tris-сумісним електродом, гарантує, що вимірювання pH завжди матимуть точну температурну компенсацію без ризику впливу іонів Ag+ або Cl- на ваші показники.

Успішне культивування клітин, виробництво білка та епігенетичний аналіз вимагають оптимального рівня рН на кожному етапі. Точне вимірювання та  контроль рН, таким чином, є обов’язковими. 

Також необхідно відстежувати рН розчинів у часі та точно вимірювати рН при різних температурах, щоб забезпечити належне функціонування процесів, залежних від рівня  рН. Не менш важливими є вибір відповідного рН-метра та електрода, вміння правильно використовувати та дбати за обладнанням.

Залиште свій запит і ми допоможемо підібрати рН-метр, електроди та буфери.