Наборы для HLA-типирования One Lambda LinkSēq

HLA-типирование методом РТ-ПЦР с технология SSP (Sequence Specific Primers)

Технологія SSP базується на використанні алель-специфічних праймерів для селективної ампліфікації цільових варіантів генів HLA. Метод дозволяє проводити високоточне визначення алелей із використанням ПЛР у реальному часі. Детекція ампліфікації здійснюється за допомогою флуоресцентного барвника SYBR Green – без потреби в електрофорезі чи зондуванні традиційними методами на основі гелю. 

Аналіз результатів відбувається шляхом інтерпретації кривих плавлення та оцінки специфічності ампліфікації з використання програмного забезпечення SureTyper, що поставляється в комплекті з реагентами.

Совместимость с оборудованием: 

• QuantStudio™
• Roche® LightCycler® 480

Состав набора:

• ПЦР-планшеты, содержащие высушенные аллель-специфические праймеры и праймеры для внутреннего контроля
• LS-буфер для амплификации геномной ДНК с SYBR Green
• ДНК-полимераза
• Оптические плёнки для ПЦР-планшетов

Необходимое дополнительное оборудование:

• Центрифуга с ротором для планшетов 
• Многоканальные дозатор (8-/12-/16 – канальный)

Рабочий процесс:

1.Этап выделения геномной ДНК

• Рекомендуется использовать готовые коммерческие наборы для выделения геномной ДНК с применением:
  • мембранной технологии в форме центрифужных колонок
  • парамагнитных частиц

  Обязательным этапом является определение концентрации и качества выделенной ДНК. Для этих задач может использоваться прибор NanoDrop Ultra производства Thermo Fisher Scientific, который сочетает функции спектрофотометра и флуориметра.

2.Подготовка и внесение рабочей смеси в планшет (около 10 минут)

3.Амплификация и детекция с помощью ПЦР в реальном времени (70 минут)

4.Интерпретация результатов в программном обеспечении SureTyper

SureTyper — это программное обеспечение, которое обеспечивает простой и удобный анализ данных диссоциации (melting curve analysis), упрощая рабочий процесс.

• Простой в использовании, интуитивно понятный интерфейс
• Использование индивидуальных средств безопасности и учётных записей пользователей
• Быстрое определение результатов благодаря встроенным визуальным подсказкам
• Автоматизированное определение генотипа/фенотипа за считанные секунды
• Возможность формирования готовых отчётов со всеми исходными данными
• Гибкие опции отчётности: обновление номенклатуры IMGT/HLA, маркировка редких и распространённых аллелей

SureTyper™ автоматически предоставляет четки результаты:  генотип и прогнозированный фенотип

Экономьте время благодаря легкой для интерпретации кривых плавления