Надёжное решение для простого и быстрого HLA-типирования с низким уровнем разрешения. Благодаря наборам реагентов LinkSēq™ вы можете типировать от 8 до 11 генов HLA (в зависимости от набора) одновременно на одной ПЦР-планшете — удобно и быстро, всего за 90 минут.
HLA-типирование методом РТ-ПЦР с технология SSP (Sequence Specific Primers)
Технологія SSP базується на використанні алель-специфічних праймерів для селективної ампліфікації цільових варіантів генів HLA. Метод дозволяє проводити високоточне визначення алелей із використанням ПЛР у реальному часі. Детекція ампліфікації здійснюється за допомогою флуоресцентного барвника SYBR Green – без потреби в електрофорезі чи зондуванні традиційними методами на основі гелю.
Аналіз результатів відбувається шляхом інтерпретації кривих плавлення та оцінки специфічності ампліфікації з використання програмного забезпечення SureTyper, що поставляється в комплекті з реагентами.
ПЦР-планшеты, содержащие высушенные аллель-специфические праймеры и праймеры для внутреннего контроля
LS-буфер для амплификации геномной ДНК с SYBR Green
ДНК-полимераза
Оптические плёнки для ПЦР-планшетов
Необходимое дополнительное оборудование:
Центрифуга с ротором для планшетов
Многоканальные дозатор (8-/12-/16 – канальный)
Рабочий процесс:
1.Этап выделения геномной ДНК
Рекомендуется использовать готовые коммерческие наборы для выделения геномной ДНК с применением:
мембранной технологии в форме центрифужных колонок
парамагнитных частиц
Обязательным этапом является определение концентрации и качества выделенной ДНК. Для этих задач может использоваться прибор NanoDrop Ultra производства Thermo Fisher Scientific, который сочетает функции спектрофотометра и флуориметра.
2.Подготовка и внесение рабочей смеси в планшет (около 10 минут)
3.Амплификация и детекция с помощью ПЦР в реальном времени (70 минут)
4.Интерпретация результатов в программном обеспечении SureTyper
SureTyper — это программное обеспечение, которое обеспечивает простой и удобный анализ данных диссоциации (melting curve analysis), упрощая рабочий процесс.
Простой в использовании, интуитивно понятный интерфейс
Использование индивидуальных средств безопасности и учётных записей пользователей
Быстрое определение результатов благодаря встроенным визуальным подсказкам
Автоматизированное определение генотипа/фенотипа за считанные секунды
Возможность формирования готовых отчётов со всеми исходными данными
