Гелевые технологии в оценке донорского химеризма

Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) остается одним из основных методов лечения тяжелых заболеваний. При этом всегда сохраняется высокий риск получения осложнений после трансплантации. 

Об осложнениях, а также необходимости качественного мониторинга донорского химеризма мы поговорили с кандидатом биологических наук, ведущим научным сотрудником, экспертом компании DiaPro Ириной Кробинец. Основные тезисы и заключения представлены в этой статье.

Факторы, определяющие исход ТГСК

Основным пострансплантационным осложнением является реакция «трансплантат против хозяина» (РТПХ), когда клетки трансплантата определяют клетки пациента как чужие и атакуют их. Именно острая РТПХ – главная причина смертности после трансплантации.

На результат ТГСК могут влиять различные факторы:

• нозология и фаза болезни на момент проведения трансплантации
• источник трансплантата
• степень HLA зависимости
• режим кондиционирования
• профилактика РТПХ

АВ0-несовместимость (АB0-конфликт)

АВ0 несовместимость не имеет определяющего влияния на исход алло-ТГСК, но понимание ее видов необходимо, чтобы в дальнейшем можно было подобрать совместимые компоненты и не вызвать гемолиз.

Схема вариантов АВ0-несовместимости

Основные осложнения, вызванные АВ0 несовместимостью:

• малая: отсроченный гемолиз
• большая: острый гемолиз, отсроченное приживление эритроидного, гранулоцитарного и мегакариоцитарного ростков, а также парциальная красноклеточная аплазия (ПККА)
• комбинированная: осложнения, характерные как для малой несовместимости, так и для большой

Читайте также: Определение HLA-антител для успешной трансплантации почки – система LABSCAN 3D

Донорский химеризм

Оценить эффективность и проведенные трансплантации, а также адекватно планировать дальнейшее лечение помогает развитие донорского химеризма в посттрансплантационный период.

Термин «химеризм» в медицине используется для характеристики организма, у которого выявляются клеточные популяции другого индивидуума того или иного вида. 

Важно не только обнаружить наличие «химеры», но и оценить ее количественно.

Общепринятые контрольные сроки донорского химеризма:

 +28, +56, +100 день после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК), далее через полгода и через год.

Впоследствии все зависит от индивидуальных особенностей организма и в каком состоянии пребывает реципиент. 

В зависимости от количества донорских клеток выделяют:

• завершенный срочный (полный) химеризм, который характеризуется полным присутствием только донорских эритроцитов (98 + 12,5 суток)
• незавершенный отсроченный (смешанный) химеризм, который характеризуется наличием как аутологичных, так и аллогенных эритроцитов (234 + 37 суток). Как правило, именно у таких пациентов и возникают ранние рецидивы 

Методы оценки донорского химеризма

• молекулярно-генетические методы, основанные на индивидуальных отличиях в структуре ДНК
• цитогенетический метод Х/У FISH
• серологический метод по антигенам групп крови эритроцитов и др.

Преимущество перечисленных методик – простота исполнения, а к недостаткам относится то, что методики не пригодны для использования в первые дни. 

Наиболее удобными считаются иммуногематологические методы исследования:

• метод агглютинации в геле
• прямая проба Кумбса

Оценка донорского химеризма по системе АВ0 имеет клиническое значение, так как именно на основании этих исследований трансфузиологи выбирают трансфузионную среду. Ниже представлена схема, которая помогает подобрать трансфузионную среду с учетом анти-А и анти-В антител, чтобы не было гемолиза.

Узнать больше о гелевых технологиях

Схема гемотрансфузионной терапии при алло-ТГСК с учетом степени химеризма

Читайте также: Прошлое, настоящее и будущее стволовых клеток

Донорский химеризм можно оценивать не только по системе АВ0, но и по другим антигенам. К примеру, по антигенам системы Резус (Rh) или системы MNS, Duffy, Kell, Kidd. Оценка донорского химеризма по антигенам системы Резус специфическая, так как данные антигены появляются позже, чем антигены системы АВ0. При этом система Резус более проста в использовании по сравнению с другими системами, так как предоставляет четкий результат и четкую силу реакции на четыре плюса. В то время как в системах MNS, Kidd четкую силу реакции на четыре плюса не всегда удается получить, так как одни моноклональные тела реагируют лучше, а другие несколько слабее. Поэтому оценивать химеризм по этим антигенам достаточно сложно.

Основной системой, определяющей совместимость и несовместимость переливаемой крови, является все-таки система АВ0.

Примеры оценки донорского химеризма разными системами

Примеры оценки донорского химеризма разными системами

Примеры оценки донорского химеризма разными системами

Иммунная нейтропения

Одним из осложнений после трансплантации может быть также иммунная нейтропения – снижение уровня нейтрофилов в крови человека. Оно бывает крайне редко, но о нем также следует знать.

На сегодняшний день существует пять систем генотипирования антигенов нейтрофилов человека HNA. Ниже представлена наглядная схема.

Экспрессия HNA

HNA-4 и HNA-5 не специфичны и представлены на разных клетках. Выработка антител к ним, как правило, не имеет явного клинического значения. Что касается антигена HNA-3, он имеет важное клиническое значение. В частности, связан с острым трансфузионно-обусловленным повреждением легких TRALI.

Клиническое значение антител к HNA:

• острое трансфузионно-обусловленное повреждение легких (TRALI)
• фебрильные трансфузионные реакции
• иммунная нейтропения после трансплантации костного мозга
• лекарственно-зависимая иммунная нейтропения
• неонатальная аутоиммунная нейтропения
• аутоиммунная нейтропения
• аутоиммунная потеря слуха

Полный химеризм – необходимый и желаемый результат, на достижение которого может потребоваться значительный промежуток времени. Поэтому очень важен последующий регулярный контроль донорского химеризма после алло-ТГСК. Именно современные гелевые технологии помогают специалистам отслеживать процесс приживления и прибегать к необходимым мерам в случае отторжения или рецидива.

Вебинар на эту тему

Аліна Козлова

Спеціаліст відділу трансфузіології та служби крові

Спеціалізація: рішення для тромбоеластографії, гелеві карти, гелеві технології.