В данной статье подробно рассмотрена процедура практического проведения серологического Т-клеточного кросс-матча с использованием методики усиленной цитотоксичности против человеческого глобулина (AHG-CDC) и В-клеточного кросс-матча. О методах тканевого типирования и протоколах подготовки можно узнать в предыдущей статье.
Проведение серологического Т-клеточного кросс-матча с использованием методики усиленной цитотоксичности против человеческого глобулина (AHG-CDC)
Реагенты и оборудование:
Пошаговая процедура:
0,4% Трипановый синий
5% Эозин-Y (натриевая основа) и фиксация формальдегидом
Читайте также: Часть 1. Методы тканевого типирования. Протоколы подготовки.
Проведение серологического В-клеточного кросс-матча
Реагенты и оборудование:
Пошаговая процедура:
0,4% Трипановый синий
5% Эозин-Y (натриевая основа) и фиксация формальдегидом
Т или В – лимфоцитарный кросс-матч (иммуномагнитные частицы)
Т или В – лимфоцитарный кросс-матч
Реагенты и оборудование:
Тушение фона - чернила, гемоглобин
ИЛИ готовый реагент FluoroQuench™ Acridine Orange/Ethidium Bromide
Пошаговая процедура:
CFDA метод
12. Планшеты можно прочесть сразу, или их можно сохранить в темноте при температуре от 20° до 25°C до 2 дней.
FQAE метод
Считывание и интерпретация результатов комплемент-зависимого микроцитотоксического кросс-матча/CDC Crossmatch (ASHI Manual)
Примечание: Обычно оценку отрицательного контроля регистрируют так, как она интерпретируется в тесте, а остальные оценки записывают с вычетом фона (т.е. значение отрицательного контроля).
5. Интерпретируйте результаты следующим образом (см. ASHI Manual, “Interpretation of Crossmatch Results”):