Рус
Рус Укр Eng

Анализ на наркотические вещества: методические рекомендации по проведению токсикологических исследований

Часть 2. Анализ крови (мочи) на наличие наркотических веществ

В первой части статьи мы рассмотрели методические рекомендации по определению алкоголя в крови (мочи) человека. Сегодняшний материал посвящен теме определения наркотических веществ.

Метод хромато-масс-спектрометрии (ГХ/МС) 

Метод хромато-масс-спектрометрии (ХМС, ГХ-МС) основан на сочетании двух аналитических методов: капиллярной газовой хроматографии – метода наиболее селективного по возможности разделения веществ и масс-спектрометрии – метода наиболее селективного и чувствительного к детектированию и структурной идентификации компонентов. Наиболее информативные и надежные результаты получаются в режиме полного сканирования с регистрацией масс-спектра. Использование мониторинга выбранных ионов позволяет повысить чувствительность определения (на порядок величины), но снижает надежность идентификации.

Метод предназначен для получения объективных данных о наличии наркотических, психоактивных веществ и их метаболитов, указываемых в диагностических выводах, результатах медицинского осмотра, экспертных выводах, результатах химико токсикологического контроля и мониторинга.

Процедура анализа наркотиков и их метаболитов в моче

 

Необходимые материалы и оборудование:

  • центрифуга лабораторная*
  • модуль нагревания и перемешивания Reacti-Term*
  • насос вакуумный 
  • вортекс
  • аналитические весы с точностью до 4-го знака
  • пипет-дозаторы сменного обьема 10-100 мкл, 100-1000 мкл, 1-10 мл, с соответствующими наконечниками
  • виалы стеклянные 5мл 20х60мм с крышками
  • виалы пластиковые центрифужные 15 мл с крышками
  • виалы стеклянные 2 мл с крышками и септами и микровставки
  • бутылки стеклянные для растворов 250 мл, 500 мл, 1000 мл
  • стаканы мерные 100 мл, 250 мл
  • мерный цилиндр 100 мл
  • подставка для 15 мл виал
  • штатив для пипет-дозаторов

*Примечание: емкостт такого оборудования, как например центрифуга или Reacti-Term, выбираются пользователем исходя из желаемого количества анализов.

 

Необходимые реактивы:

Все растворителя должны быть максимально доступной чистоты!

  • гидроксид натрия
  • 0.1М соляная кислота
  • сульфат натрия
  • 10% раствор амиака
  • BSTFA для дериваизации
  • дихлорметан
  • этилацетат
  • изооктан
  • изопропанол
  • метанол
  • индикаторные полоски

Процедура экстракции

Экстракция мочи для выявления барбитуратов

  1. 3 мл мочи подкислить насыщенным раствором соляной кислоты до рН 2-3 (проверить с помощью универсального индикатора – розовую окраску).
  2. Добавить 3 мл дихлорметана и перемешать на вортексе 5 мин 900 об/мин.
  3. Смесь центрифугировать и отобрать нижний слой (центрифуга 4000 об/мин 5 мин).
  4. К экстракту добавить обезвоженный Na2SO4.
  5. Сухой экстракт перенести в виалу и удалить растворитель выпариванием (50 оС баня).
  6. Остаток растворить в 100 мкл метанола, перенести в виал и инжектировать 1 мкл в прибор.

Экстракция мочи для выявления бензодиазепинов, кокаина, РСР и метадона

  1. 3 мл мочи подлужить насыщенным раствором аммиака 10% до рН 9-10 (проверить с помощью универсального индикатора – сине-зеленую окраску).
  2. Добавить 3 мл дихлорметана и перемешать на вортексе 5 мин 900 об/мин.
  3. Смесь центрифугировать и отобрать нижний слой (центрифуга 4000 об/мин 5 мин).
  4. К экстракту добавить обезвоженный Na2SO4.
  5. Сухой экстракт перенести в виалу и удалить растворитель выпариванием (50 оС баня).
  6. К остатку добавить 70 мкл BSTFA и выдержать при 70 °С в течение 30 мин. Перенести в виалу и 1 мкл ввести в прибор.

Экстракция мочи для выявления фенилалкиламинов

  1. 3 мл мочи подлужить насыщенным раствором аммиака 10% до рН 9-10 (проверить с помощью универсального индикатора – сине-зеленую окраску).
  2. Добавить 3 мл дихлорметана и перемешать на вортексе 5 мин 900 об/мин.
  3. Смесь центрифугировать и отобрать нижний слой (центрифуга 4000об/мин 5 мин).
  4. К экстракту добавить обезвоженный Na2SO4.
  5. Сухой экстракт перенести в чашку для выпаривания при комнатной температуре.
  6. К остатку добавить 100 мкл метанола, омыть стенки чашки. Перенести в виалу и инжектировать 1 мкл в прибор.

Экстракция мочи для выявления метаболита ТГК (марихуана)

  1. К 3 мл мочи добавить 0,5 мл 10N раствора NaOH и выдержать при 50 oС в течение 20 мин.
  2. После охлаждения довести рН до 2-3 разбавленной соляной кислоты.
  3. Добавить 3 мл смеси изооктан:этилацетат 7:1 и перемешать на вортексе 5мин 900об/мин.
  4. Смесь центрифугируют 4000об/мин 5мин.
  5. Отбирают верхний слой и добавляют обезвоженный Na2SO4.
  6. Сухой экстракт переносят в виалу и выпаривают растворитель досуха.(50С баня)
  7. К остатку добавить 70 мкл BSTFA и выдержать при 70С в течение 30 мин. Переносят в виалу и вводят 1 мкл в прибор.

Экстракция мочи для выявления опиатов

  1. К 3 мл мочи добавить 1,5 мл соляной кислоты до рН 1-2, закрыть пробкой и выдержать на бане при 90 °С 1 час.
  2. Смесь охладить довести рН до 8-9 раствором аммиака.
  3. Добавить смесь растворителей метиленхлорид:изопропанол (8:1) и экстрагировать 5 мин на вортексе 900об/мин.
  4. Центрифугировать 4000 об/мин 5 мин.
  5. Отбирают нижний слой.
  6. Экстракт перенести в виал и сушить с помощью Na2SO4.
  7. Сухой экстакт перенести в виалу и выпарить растворитель (50С на бане).
  8. К остатку добавить 70 мкл BSTFA и выдержать 30 мин при 70С.
  9. Перенести в виалу и ввести в прибор 1 мкл.

Условия хроматографирования:

  • температурная програма колонок: 100оС выдержква 1 мин; со скоростью  35оС/мин до 300оС; выдержка  15 мин
  • температура инжектора: 250оС
  • режим деления потока: 1:40
  • поток газа носителя: 1 мл/мин
  • температура трансфер лайна: 250оС 
  • температура источника: 200оС
  • диапазон мас m/z: 38-550 а.о.м.
  • обьем пробы: 1 мкл

Ниже приведены примеры хроматограмм

Рис.1. Хроматограмма образца с содержанием ТГК(марихуана).

Рис.1. Хроматограмма образца с содержанием ТГК(марихуана).


Рис. 2. Хроматограмма образца с содержанием метадона.

Рис. 2. Хроматограмма образца с содержанием метадона.


Рис.3. Хроматограмма образца с содержанием амфетамина.

Рис.3. Хроматограмма образца с содержанием амфетамина.

Для того, чтобы информация всегда была у вас под рукой, мы подготовили методические рекомендации в электронном формате.

Загрузить брошюру

Примеры утсановленного в лаборатории оборудования

Ознакомиться с хроматографом TRACE 1610 можна здесь

Будьте в курсе новостей

    A