Микротомы: виды и применение

Микротом — это механический инструмент для разрезания биологических образцов на очень тонкие срезы для дальнейшего исследования под микроскопом. Правильный выбор микротома имеет важное значение для получения наилучшего результата в исследованиях. 

Существуют различные виды микротомов в зависимости от назначения и режима работы. По последнему параметру микротомы можно разделить на механические, полуавтоматические, и автоматические. 

Микротом ротационный

Предназначен для резки полутонких и тонких срезов для световой микроскопии. Принцип действия: маховик вращается на 360 градусов, перемещая образец вертикально к режущей поверхности. Держатель блока установлен на стальной каретке, которая движется вверх и вниз по канавкам с помощью микрометрического винта, при этом нарезающего идеально ровные блоки. Важно подобрать решение, которое обеспечит выполнение задач лаборатории, например решение от производителя Leica Biosystems.

Преимущества: возможность резки больших блоков ткани; легкая адаптация ко всем типам тканей; регулируемый угол среза; большой и тяжелый прибор, поэтому меньше вибрации при резке твердых тканей. 

Санный микротом

Типичные области применения — невропатология и офтальмологическая патология. С помощью него можно выполнять подготовку больших образцов, например, залитых в парафин гистологических тканей, которые прикреплены к деревянным брускам. Толщина среза составляет ориентировочно от 1 до 60 мкм.

Механизм действия: держатель блока установлен на стальной каретке, которая не двигается, при этом нож скользит вперед и назад по направляющим. 

Преимущества: есть возможность регулировать угол наклона ножа для более легкого разрезания различных участков ткани. Недостаток: более медленный, чем роторный микротом (механический или полуавтоматический).

Криостат

Внедрение методов флуоресцентного окрашивания антител привело к необходимости получения тонких срезов (3-5 мкм) свежезамороженной ткани без дефектов кристаллов льда. 

Криостат состоит из роторного микротома, помещенного в камеру глубокой заморозки. Камера оборудована стеклянной дверцей, через которую материал проходит внутрь и наружу, а также ультрафиолетовой лампой для обеззараживания камеры от инфекционных возбудителей. Температуру можно регулировать от -10ºC до -40ºC. Толщина срезов составляет от 1 мкм до порядка 100 мкм. У производителя Leica Biosystems есть решение под задачи каждой лаборатории.

Вибрационный микротом

Разработан для разрезания тканей, которые не были обработаны или заморожены. Используется в гистохимии ферментов, ультраструктурной гистохимии.

Эти точные инструменты поддерживают морфологию клеток, активность ферментов, а также жизнеспособность клеток ткани.

Амплитуда вибрации регулируется изменением электрического напряжения, подаваемого на нож. Ткани разрезаются с очень низкой скоростью, чтобы избежать дезинтеграции.